甲型流感病毒及乙型流感病毒核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

產品簡介：
通用名稱：甲型流感病毒及乙型流感病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
英文名稱：Diagnostic Kit for influenza A and influenza B Virus RNA (PCR-Fluorescence Probing)
注冊證號：國食藥監(jiān)械（準）字2013第3401571號

適用范圍：
本試劑盒用于定性檢測人口咽拭子樣本中甲型流感病毒或（和）乙型流感病毒RNA。

檢驗原理：
本試劑盒利用實時熒光PCR檢測技術，以甲型流感病毒M基因、乙型流感病毒NP基因中的高度保守序列為靶區(qū)域，設計特異性引物和TaqMan熒光探針，通過進行一步法RT-PCR擴增，在一個擴增管中實現(xiàn)對口咽拭子樣本中的甲型流感病毒/乙型流感病毒的快速檢測，并通過內標人β肌動蛋白（β-actin）和外標質控品（強陽性對照、臨界陽性對照和陰性對照），對檢測過程進行全程質量控制。本試劑盒設計的內標β-actin是橫紋肌肌纖維中的一種主要蛋白質成分，也是肌肉細絲及細胞骨架微絲的主要成分，廣泛存在于哺乳動物的組織或細胞中，表達穩(wěn)定，不受細胞周期、藥物作用或其他外因的影響。采集的人口咽拭子樣本中含有人口腔上皮細胞，其中有穩(wěn)定表達的β-actin存在。因此本試劑盒針對人源β-actin mRNA設計了特異性引物和Taqman探針作為試劑盒內標。
本試劑盒組成包括核酸提取試劑、核酸擴增試劑和外標質控品三部分。其中核酸提取試劑組分包括核酸提取液A、核酸提取液B、核酸提取液C和樣本稀釋液?？谘适米訕颖竞屯鈽速|控品使用核酸提取試劑進行核酸提取，通過核酸擴增試劑（Inf.A/Inf.B/β-actin擴增反應液、Taq DNA 聚合酶、M-MLV反轉錄酶）進行擴增，并實時采集熒光信號，儀器軟件系統(tǒng)自動繪制出擴增曲線。根據(jù)熒光背景信號確定閾值后，得到未知樣本的閾循環(huán)值（Ct值），實現(xiàn)對未知樣本的檢測。

產品特點：
1、采集口咽拭子樣本，減少病患痛苦；
2、采用Real-time PCR方法中的TaqMan探針法，技術成熟；
3、具有高靈敏度和高特異性；
4、本試劑盒采用了內標和外標兩種標記監(jiān)控試驗過程（外標采用了強陽性對照、臨界陽性對照和陰性對照，本試劑盒內標采用人源β-actin作監(jiān)控目標），能很好的監(jiān)控從樣本提取到PCR的過程；
5、熒光信號檢測，節(jié)約擴增時間，避免了后續(xù)開蓋過程所引起的污染問題；
6、采用了多重熒光PCR技術，實現(xiàn)同時對甲型流感病毒/乙型流感病毒兩種病原體進行檢測并分型。

產品性能：
1、亞型檢測能力：本試劑盒針對甲型流感病毒的季節(jié)性H1N1亞型、H3N2亞型、2009新型H1N1亞型、H5N1亞型、H7N3亞型、H9N1亞型、H7N9亞型以及乙型流感病毒的檢測能力均經(jīng)過實驗室驗證。
2、最低檢測限（分析靈敏度）：根據(jù)產品分析性能評估結果，與金標準方法――病原體細胞分離培養(yǎng)方法比較，本試劑盒針對甲型流感病毒（包括季節(jié)性H1N1亞型和H3N2亞型）和乙型流感病毒兩種病原體檢測下限，即半數(shù)細胞致死量TCID50分別為0.022和0.026；
3、分析特異性：本試劑盒與感染部位相似或者感染癥狀相似的其他病毒和細菌，如人3型/7型腺病毒、呼吸道合胞病毒B型、人副流感病毒1/2/3型、腸道病毒71型、柯薩奇病毒16型、肺炎支原體、肺炎衣原體、鼻病毒、人巨細胞病毒、人偏肺病毒、博卡病毒、人冠狀病毒OC43/229E、人冠狀病毒NL63/HKU1、EB病毒、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、大腸桿菌、卡他莫拉菌、結核分枝桿菌、銅綠假單胞菌、表皮葡萄球菌、唾液鏈球菌、化膿鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌、百日咳桿菌、麻疹病毒等其它相關病原體均無交叉反應（以上病毒濃度為106pfu/ml以上，細菌為106 cfu/ml以上，肺炎支原體和肺炎衣原體為107copies/ml）。
4、精密度：對于由甲型流感病毒H3N2亞型毒株和乙型流感病毒毒株制備成的高、低兩個濃度的精密度參考品進行檢測，計算其變異系數(shù)（CV值）。批內精密度不大于5%，批間精密度不大于10%。
5、常見干擾物質，如血液、唾液、鼻分泌物在分別在10%時，不會對樣本檢測結果產生影響。但考慮上述干擾物質中的RNA酶的影響，仍提醒采樣時應盡量避免上述物質的干擾。
6、檢驗樣本中含有以下濃度的藥物，不會影響到試劑盒對樣本檢測結果的判定：0.2mg/L倍氯米松、0.15mg/L地塞米松、12mg/L曲安西龍、0.4mg/L布地奈德、0.05 mg/L莫美達松、0.5mg/L氟替卡松、75mg/L苯佐卡因、5mg/L扎那米韋、37.5mg/L奧司他韋、75mg/L妥布霉素、50mg/L金剛烷胺、75mg/L硫磺、150mg/L金英、50mg/L鹽酸金剛乙胺、0.125mg/L腎上腺素、25mg/L薄荷腦、0.05%羥甲唑啉、500mg/L氟尼縮松、500mg/L莫匹羅星。